細胞是生命的基本單位，細胞生物學是研究細胞結(jié)構(gòu)和功能的學科。細胞生物學研究熱點主要聚焦在細胞內(nèi)部結(jié)構(gòu)、細胞信號通路、細胞器功能和結(jié)構(gòu)解析、能量代謝和表觀遺傳等方面，細胞生物學研究難點在于細胞是非常精密且微小的單位，而觀察設(shè)備存在空間、時間以及分辨率上的限制。

隨著顯微鏡和染色技術(shù)的改進，科學家們能夠看到越來越多的細胞內(nèi)部細節(jié)。范·列文虎克使用的顯微鏡可能把標本放大了幾百倍。今天，高分辨率熒光顯微鏡可以在微米及以下范圍觀察細胞器的形狀，借助活細胞工作站可以將細胞的生命活動完整記錄下來；通過激光掃描共聚焦顯微鏡，可以對細胞進行三維光學切片成像，使研究人員能夠生成細胞的詳細三維圖像；利用STED納米顯微鏡可以探究細胞器內(nèi)部結(jié)構(gòu)、離子通道的亞基甚至分子水平的精細結(jié)構(gòu)信息……想要充分擴展自己的研究成果并獲得高質(zhì)量的數(shù)據(jù)，選擇合適的顯微成像方法至關(guān)重要。

細胞生物學研究痛點

STED是基于STELLARIS共聚焦平臺純光學超高分辨技術(shù)，結(jié)合快速熒光壽命采集系統(tǒng)實現(xiàn)XY軸30nm分辨率極限。同時運用FLIM Phasor技術(shù)可顯著降低STED激光能量，適用于活細胞超高成像。TauSTED特別適合應(yīng)用于組織和細胞內(nèi)微小結(jié)構(gòu)和物質(zhì)的觀察，如膜蛋白與膜微結(jié)構(gòu)域、細胞器內(nèi)部的微小結(jié)構(gòu)觀察、細胞骨架結(jié)構(gòu)、神經(jīng)元突觸研究、細菌內(nèi)部的物質(zhì)結(jié)構(gòu)研究、病毒學研究、蛋白復合物研究等等。

 

 

 

TIRF（全內(nèi)反射熒光顯微鏡）主要應(yīng)用方向：細胞膜成像、囊泡運輸、單分子示蹤、受體動力學變化/聚集、受體超分辨成像、體外蛋白研究、細胞骨架組裝、胞吞胞吐、細胞粘附、細胞運動。

 

STELLARIS FALCON是Leica最新的集成整合方案，將FLIM結(jié)合到STELLARIS共聚焦平臺，實現(xiàn)快速FLIM數(shù)據(jù)采集。

目前，F(xiàn)LIM技術(shù)越來越多的應(yīng)用到生物學研究中，常見的應(yīng)用有測定分子相互作用FLIM-FRET，環(huán)境感知和組分分離等，在活細胞中典型應(yīng)用就是利用FLIM-FRET研究活細胞分子相互作用。

排除熒光漂白和淬滅對FRET測定的影響，精準測量分子間相互作用強度。無需考慮acceptor熒光，實驗簡單。可進行離體活細胞和在體活細胞快速FLIM-FRET測量。

活細胞解決快速成像

細胞是組成生命個體的基本單位，實時在線研究細胞的增殖、代謝、凋亡和應(yīng)激反應(yīng)，有助于了解細胞的生命規(guī)律，通過現(xiàn)象揭示生命本質(zhì)。

THUNDER高分辨活細胞解決方案

STELLARIS Lightning

細胞生物學研究已經(jīng)不再局限于細胞層面觀察，而是聚焦于亞細胞器、染色體、離子通道等細小結(jié)構(gòu)，傳統(tǒng)寬場熒光顯微鏡雖然有成像速度快、光毒性低的有點，但是空間分辨率并不能滿足對亞細胞器更精細結(jié)構(gòu)解析的分辨率需求。Leica STELLARIS Lightning超分辨系統(tǒng)基于共聚焦平臺，XY分辨率達到120nm，Z方向達到了200nm，超越了普通共聚焦光學極限。

 

STELLARIS的每個檢測器都是光譜式檢測器，可以實現(xiàn)410nm-850nm光譜檢測，配備485-685nm或440-790nm白激光，譜線任意可調(diào)，滿足染料最佳激發(fā)譜線需求。白激光和HyD檢測器實現(xiàn)激發(fā)和發(fā)射光譜檢測自由。STELLARIS共聚焦平臺使用棱鏡分光和狹縫檢測，在任意波長都可以有非常高的分光效率，利用熒光信號。

 

TauSense時間分辨共聚焦成像系統(tǒng)

NE-115細胞同時標記了actin-mNeonGreen、Mitotracker Green、細胞核Red和SiR-tubulin共4種熒光染料，但由于LifeAct-mNeonGreen和Mitotracker Green的發(fā)射光譜高度重疊，NuC Red和SiR-tubulin的發(fā)射光譜高度重疊，所以在用常規(guī)共聚焦（左圖）拍攝時只能體現(xiàn)出兩種信號的差異。而在TauSeparation模式下（右圖），基于平均光子到達時間AAT，我們使用一個檢測器就可以同時將這兩種發(fā)射光譜重疊的染料區(qū)分出來（LifeAct-mNeonGreen-紅色，Mitotracker Green-綠色，Nuc Red–青色，SiR-tubulin–品紅色），所以只需要使用兩個檢測器，就可以得到這幅沒有串色的4色熒光圖像了。

活體動物、類器官水平

STELLARIS DIVE光譜式多光子顯微成像系統(tǒng)

 

多光子FLIM在活體細胞水平研究藥物靶向作用機理

用FLIM-FRET研究藥物對胰腺導管腺癌(PDAC)的靶向作用，實現(xiàn)了對腫瘤不同微區(qū)的單細胞反應(yīng)的觀察。

STELLARIS DLS光片成像

Leica STELLARIS共聚焦平臺可以無縫升級light sheet功能，升級后一套儀器同時擁有完整的共聚焦和光片的功能。Leica DLS數(shù)字光片技術(shù)可快速實現(xiàn)雙側(cè)照明，具有光毒性低，成像速度快，適合3D成像的優(yōu)點。DLS和雙光子共聚焦搭配，可以實現(xiàn)定點損傷和快速光片成像相結(jié)合。

 

Leica激光顯微切割優(yōu)勢

THUNDER Imager EM Cryo CLEM冷凍光電聯(lián)用助力細胞超精細結(jié)構(gòu)解析

傳統(tǒng)光電聯(lián)用受限于光鏡分辨率，熒光數(shù)據(jù)在電鏡下目標不明確，THUNDER Cryo-CLEM是冷凍光電聯(lián)用專用設(shè)備，具有分辨率高可以精準識別細胞結(jié)構(gòu)，在相關(guān)工作流程中平穩(wěn)、安全傳送坐標、圖像和樣本。

徠卡冷凍光電聯(lián)用優(yōu)勢：

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